Técnica:
1. Obtener la muestra de sangre por punción venosa
2. Centrifugar a 2500 rpm por 5 minutos para obtener el suero.
3. Tomar Dos gotas de suero utilizando la pipeta proporcionada en el equipo y colocarlas cuidadosamente en el área de prueba del casete.
Interpretación:
Dos líneas (Con y TnI) POSITIVO
Un línea (Con) Negativo
Una línea (TnI) o ninguna NO VALIDO
Nota: La líne Con, siempre saldrá.
Fundamento:
El objetivo de las pruebas cruzadas de compatibilidad es investigar anticuerpos específicos activos a 37°C en el suero del paciente contra los eritrocitos del donador y viceversa.
La prueba Cruzada se divide en tres partes:
1. Prueba mayor que contiene el suero del paciente y eritrocitos del donador (D)
2. Prueba menor que contiene el suero del donador y los eritrocitos del paciente (R)
3. El auto testigo que contiene el suero y eritrocitos del paciente (R)
Técnica
~Centrifugar el tubo del receptor 5 minutos a 3500 revoluciones por minuto para separar completamente el suero de los eritrocitos del coágulo.
~ Colocar Dos gotas de sangre del tubo en otro tubo y adicionar la solución salina.
~ Realizar tres lavados por un tiempo de 3 minutos.
~ Después de los lavados hacer una solución de eritrocitos al 5% con solución salina (este tubo contiene eritrocitos lavados de la sangre del donador)
~ Colocar en una gradilla tres tubos previamente rotulados
~ Con una pipeta pasteur colocar Dos gotas de suero o plasma del donador y una gota de células o eritrocitos del paciente en el tubo de la prueba menor.
~ Colocar con una pipeta en el tubo del auto testigo Dos gotas de suero del paciente y una gota de eritrocitos al mismo tiempo (paciente)
~ Mezclar perfectamente el contenido de los tubos centrifugar durante 30 segundos a 3400 revoluciones por minuto.
~ Leer y reportar en la hoja de anotaciones (SR) Salina rápida
* Si en alguno de los tubos se observa hemólisis glutina ción debe rectificarse de inmediato el grupo sanguíneo tanto del donador como el receptor.
~ Si las lecturas o negativas continuar con el procedimiento a incubar los tubos en el baño maría a 37°C durante una hora
~ Una vez terminada la incubación centrífuga rápidamente todos los tubos durante 30 segundos a 3400 revoluciones por minuto.
~ Leer y reportar los resultados en la hoja de reporte.
~ Si se observa aglutinación y hemólisis la prueba es incompatible si el resultado es negativo se sigue con la prueba.
~ Lavar los tubos tres veces con solución salina de cantando y secando después de cada centrifugacion.
~ Agregar a cada tubo una gota de suero de Cómo mezclar y centrifugar durante 30 segundos a 3400 revoluciones por minuto.
~ Leer los resultados y anotar en la hoja de reporte.
Los eritrocitos clasificados como D-u poseen el antígeno D pero esta expresado débilmente, por ello no aglutinan directamente con la mayoría de los sueros anti Rh (D), sin embargo es reconocido con la antiglobulina humana (suero de Coombs)
La técnica para realizar esta práctica se hace de la siguiente manera:
1.incubar el tubo con la muestra(el que dio negativo en el Rh en la determinación de D) a 37•c de 15 a 60 minutos
2. Lavar los eritrocitos de la siguiente manera:
3. Agregar 3 gotas de ssf y agitar suavemente para resuspender los eritrocitos, posteriormente llenar los terceras partes del tubo con ssf procurando que quede una suspensión homogénea
4.centrifugar a 3400 r.p.m por tres minutos y decantar
5. Repetir 3 veces el paso anterior, al término del último lavado decantar perfectamente la solución salina
6. Invertir el tubo y secar el borde con una gasa.
7.agregar dos gotas de suero de Coombs y mezclar suavemente
8. Centrifugar a 3400 r.p.m por 15s o a 1000 r.p.m por un minuto
9. Resuspender suavemente el botón de eritrocitos del fondo del tubo y observar microscopicamente la aglutinación y anotar el resultado en número de cruces
Para determinar la presencia o ausencia del antígeno Rh (D) se utilizará el reactivo hemotipificador anti-Rh (D)
Técnica en tubo
1. Rotula los tubos con el número de muestra correspondiente
2. Coloca una gota de suero hemotipificador Anti-D y para el control una gota de albúmina al 22%
3.agrega una gota de suspensión de eritrocitos al 5% de la muestra problema a cada uno de los tubos
4. Centrifugar a 3400 r.p.m por 15 segundos o 1000 por un minuto
5. Observa microscopicamente la aglutinación e informa mediante cruces
La aglutinación deso eritrocitos Anti-D se clasifica como Rh positivos, la ausencia de la aglutinación se clasifica como posible Rh negativo. En este caso se sugiere continuar con la l prueba variante D
Introducción:
El virus de la inmunodeficiencia humana se ha reconocido como el agente etiológico del síndrome de inmunodeficiencia adquirida.
Técnica:
1. Obtener la muestra de sangre por punción venosa
2. Centrifugar a 2500 rpm por 5 minutos para obtener el suero.
3. Tomar Dos gotas de suero utilizando la pipeta proporcionada en el equipo y colocarlas cuidadosamente en el área de prueba del casete.
Interpretación:
Dos líneas (Con y TnI) POSITIVO
Un línea (Con) Negativo
Una línea (TnI) o ninguna NO VALIDO
Nota: La líne Con, siempre saldrá.
La identificación de los anticuerpos naturales del sistema ABO se realiza utilizando antígenos conocidos: eritrocitos A,B y O, que al ponerlos en contacto con el suero problema, se manifiesta por medio de aglutinación
TECNICA EN TUBO:
1. Los tubos se rotulan con el número de la muestra y la letra de los eritrocitos correspondientes, por ejemplo 1A, 1B, 1O.
2.agregar dos gotas del suero del paciente (suero problema) a cada tubo
3.agregar una gota de eritrocitos al 5% a cada tubo según corresponda
4. Se centrifugara a 3400 r.p.m por 15 segundos o a 1000 r.p.m por 60s
5. Observa microscopicamente las aglutinaciones e informa mediante cruces.
Objetivo: se debe de encontrar el "A" este determinará si se tarta de un subgrupo A1 o A2
Los eritrocitos poseen antígeno A pueden ser subdivididos en Al y A2 las células rojas del grupo A que aglutinan con anti Al lectina se consideran del subgrupo aquellas que no aglutinan con anti A1 lectina se clasifican como A2 aproximadamente el 80% de las células son Al y restante 20% se consideran A2
Método en tubo:
1. Preparar una suspensión de glóbulos rojos en solución salina al 5%
2. Colocar una gota de Anti A lectina en un tubo de 10 X 75
3. Con una pipeta pasteur, agregar una gota de la suspensión de glóbulos rojos.
4. Mezclar bien y centrifugar a 2500 r.p.m por un minuto
5. Re suspender los glóbulos rojos cuidadosamente y examinar el tubo en busca de
aglutinación
INTERPRETACIÓN
1.cuando los glóbulos rojos son aglutinados la reacción es positiva he indica la presencia de antígeno A1 y por lo tanto los glóbulos rojos son A1
2.cuando los glóbulos rojos no aglutinan, la reacción es negativa e indica la ausencia de antígeno A1 y los glóbulos rojos son A2
3. Cuando se investiga en una sangre AB, Con antia Al lectina, si aglutina es AlB, si no aglutina es A2B
